類別

檢測方法和試劑盒

描述

雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒用于通過報告質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞并測量熒光素底物的熒光強(qiáng)度來檢測基因調(diào)控，以反映熒光素酶表達(dá)水平。實現(xiàn)雙熒光素酶報告基因檢測，以熒光素為底物檢測螢火蟲熒光素酶，以腔腸素為底物檢測海腎熒光素酶，同時抑制螢火蟲熒光素酶的活性。雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒可以靈敏、高效地檢測基因元件調(diào)控的熒光素酶的表達(dá)。通常，轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件克隆在螢火蟲熒光素酶上游，或者3'-UTR調(diào)控區(qū)克隆在螢火蟲熒光素酶下游。轉(zhuǎn)染的細(xì)胞用相應(yīng)的刺激劑誘導(dǎo)并裂解以確定熒光素酶活性。通過熒光素酶活性評估調(diào)節(jié)元件的刺激誘導(dǎo)作用。海腎熒光素酶作為校正轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參，以消除孔間細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。螢火蟲熒光素酶催化熒光素發(fā)射560 nm，海腎熒光素酶催化腔腸素發(fā)射465 nm。螢火蟲熒光素酶催化熒光素發(fā)射560 nm，海腎熒光素酶催化腔腸素發(fā)射465 nm。螢火蟲熒光素酶催化熒光素發(fā)射560 nm，海腎熒光素酶催化腔腸素發(fā)射465 nm。

貯存

-30～-15℃保存，≤0℃運輸。溶解分裝試劑：-85～-65℃長期保存，或-30～-15℃短期保存不超過1個月； Stop & Reaction Buffer：2 ~ 8°C 長期保存。

筆記

僅供研究使用

應(yīng)用筆記

熒光信號強(qiáng)：適合檢測弱啟動子或低表達(dá)調(diào)控檢測范圍寬：線性范圍高達(dá)8個數(shù)量級（R2>0.99）高靈敏度：檢測靈敏度低至10-18mol